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96T人17-羥皮質(zhì)類固醇ELISA檢測(cè)試劑盒
發(fā)布時(shí)間： 2012-09-03 點(diǎn)擊次數(shù)： 1264次人17-羥皮質(zhì)類固醇ELISA檢測(cè)試劑盒
本試劑僅供研究使用 標(biāo)本：體液
試驗(yàn)原理：
17-OHCS試劑盒是固相夾心法酶聯(lián)免疫吸附實(shí)驗(yàn)（ELISA）.已知17-OHCS濃度的標(biāo)準(zhǔn)品、未知濃度的樣品加入微孔酶標(biāo)板內(nèi)進(jìn)行檢測(cè)。先將17-OHCS和生物素標(biāo)記的抗體同時(shí)溫育。洗滌后，加入親和素標(biāo)記過的HRP。再經(jīng)過溫育和洗滌，去除未結(jié)合的酶結(jié)合物，然后加入底物A、B，和酶結(jié)合物同時(shí)作用。產(chǎn)生顏色。顏色的深淺和樣品中17-OHCS的濃度呈比例關(guān)系。
安全性
避免直接接觸終止液和底物A、B。一旦接觸到這些液體，請(qǐng)盡快用水沖洗。
實(shí)驗(yàn)中不要吃喝、抽煙或使用化妝品。
不要用嘴吸取試劑盒里的任何成份。人17-羥皮質(zhì)類固醇ELISA檢測(cè)試劑盒
操作注意事項(xiàng)
試劑應(yīng)按標(biāo)簽說明書儲(chǔ)存，使用前恢復(fù)到室溫。稀稀過后的標(biāo)準(zhǔn)品應(yīng)丟棄，不可保存。
實(shí)驗(yàn)中不用的板條應(yīng)立即放回包裝袋中，密封保存，以免變質(zhì)。
不用的其它試劑應(yīng)包裝好或蓋好。不同批號(hào)的試劑不要混用。保質(zhì)前使用。
使用一次性的吸頭以免交叉污染，吸取終止液和底物A、B液時(shí)，避免使用帶金屬部分的加樣器。
使用干凈的塑料容器配置洗滌液。使用前充分混勻試劑盒里的各種成份及樣品。
洗滌酶標(biāo)板時(shí)應(yīng)充分拍干，不要將吸水紙直接放入酶標(biāo)反應(yīng)孔中吸水。
底物A應(yīng)揮發(fā)，避免長(zhǎng)時(shí)間打開蓋子。底物B對(duì)光敏感，避免長(zhǎng)時(shí)間暴露于光下。避免用手接觸，有毒。實(shí)驗(yàn)完成后應(yīng)立即讀取OD值。
加入試劑的順序應(yīng)一致，以保證所有反應(yīng)板孔溫育的時(shí)間一樣。
按照說明書中標(biāo)明的時(shí)間、加液的量及順序進(jìn)行溫育操作。樣品收集、處理及保存方法
血清-----操作過程中避免任何細(xì)胞刺激。使用不含熱原和內(nèi)毒素的試管。收集血液后，1000×g離心10分鐘將血清和紅細(xì)胞迅速小心地分離。
血漿-----EDTA、檸檬酸鹽、肝素血漿可用于檢測(cè)。1000×g離心30分鐘去除顆粒。
細(xì)胞上清液---1000×g離心10分鐘去除顆粒和聚合物。
組織勻漿-----將組織加入適量生理鹽水搗碎。1000×g離心10分鐘，取上清液
保存------如果樣品不立即使用，應(yīng)將其分成小部分-70 ℃保存，避免反復(fù)冷凍。盡可能的不要使用溶血或高血脂血。如果血清中大量顆粒，檢測(cè)前先離心或過濾。不要在37℃或更高的溫度加熱解凍。應(yīng)在室溫下解凍并確保樣品均勻地充分解凍。人17-羥皮質(zhì)類固醇ELISA檢測(cè)試劑盒
操作步驟
使用前，將所有試劑充分混勻。不要使液體產(chǎn)生大量的泡沫，以免加樣時(shí)加入大量的氣泡，產(chǎn)生加樣上的誤差。
根據(jù)待測(cè)樣品數(shù)量加上標(biāo)準(zhǔn)品的數(shù)量決定所需的板條數(shù)。每個(gè)標(biāo)準(zhǔn)品和空白孔建議做復(fù)孔。每個(gè)樣品根據(jù)自己的數(shù)量來定，能使用復(fù)孔的盡量做復(fù)孔。標(biāo)本用標(biāo)本稀釋液1：1稀釋后加入50ul于反應(yīng)孔內(nèi)。
加入稀釋好后的標(biāo)準(zhǔn)品50ul于反應(yīng)孔、加入待測(cè)樣品50ul于反應(yīng)孔內(nèi)。立即加入50ul的生物素標(biāo)記的抗體。蓋上膜板，輕輕振蕩混勻，37℃溫育1小時(shí)。
甩去孔內(nèi)液體，每孔加滿洗滌液，振蕩30秒，甩去洗滌液，用吸水紙拍干。重復(fù)此操作3次。如果用洗板機(jī)洗滌，洗滌次數(shù)增加一次。
每孔加入80ul的親和鏈酶素-HRP，輕輕振蕩混勻，37℃溫育30分鐘。
甩去孔內(nèi)液體，每孔加滿洗滌液，振蕩30秒，甩去洗滌液，用吸水紙拍干。重復(fù)此操作3次。如果用洗板機(jī)洗滌，洗滌次數(shù)增加一次。
每孔加入底物A、B各50ul，輕輕振蕩混勻，37℃溫育10分鐘。避免光照。
取出酶標(biāo)板，迅速加入50ul終止液，加入終止液后應(yīng)立即測(cè)定結(jié)果。
在450nm波長(zhǎng)處測(cè)定各孔的OD值。6號(hào)標(biāo)準(zhǔn)品以上的結(jié)果為非線性的，根據(jù)此標(biāo)準(zhǔn)曲線無法得到的結(jié)果。
試劑盒性能
1. 靈敏度：zui小的檢測(cè)濃度小于1號(hào)標(biāo)準(zhǔn)品。稀釋度的線性。樣品線性回歸與預(yù)期濃度相關(guān)系數(shù)R值為0.990。
2. 特異性：不與人其它細(xì)胞因子反應(yīng)。
3. 重復(fù)性：板內(nèi)、板間變異系數(shù)均小于10%。人17-羥皮質(zhì)類固醇ELISA檢測(cè)試劑盒
果 判 斷 與 分 析
1、儀器值：于波長(zhǎng)450nm的酶標(biāo)儀上讀取各孔的OD值2、以吸光度OD值為縱坐標(biāo)（Y），相應(yīng)的17-OHCS標(biāo)準(zhǔn)品濃度為橫坐標(biāo)（X），做得相應(yīng)的曲線，樣品的17-OHCS含量可根據(jù)其OD值由標(biāo)準(zhǔn)曲線換算出濃度。
3、檢測(cè)值范圍：0-80umol/L
4、敏感度： 0.1 umol/L
FGF5（Fibroblast Growth Factor 5） 纖維母細(xì)胞生長(zhǎng)因子5抗體 0.1ml
Phospho-cdc25C （Ser216） 磷酸化細(xì)胞分裂周期蛋白25C抗體 0.1ml
Phospho-cdc25C （Thr48） 磷酸化細(xì)胞分裂周期蛋白25C抗體 0.1ml
Phospho-CDC42 （Ser71） 磷酸化細(xì)胞分化周期CDC42蛋白抗體 0.1ml
Phospho-CDK2 （Thr160） 磷酸化周期素依賴性激酶2抗體 0.1ml
Phospho-CDK9 （Thr186） 磷酸化周期素依賴性激酶9抗體 0.1ml
FGF5（Fibroblast Growth Factor 5） 纖維母細(xì)胞生長(zhǎng)因子5抗體 0.2ml
KGF/FGF-7（Keratinocyte growth factor precursor） 角質(zhì)形成細(xì)胞生長(zhǎng)因子/纖維母細(xì)胞生長(zhǎng)因子-7抗體 0.1ml
KGF/FGF-7（Keratinocyte growth factor precursor） 角質(zhì)形成細(xì)胞生長(zhǎng)因子/纖維母細(xì)胞生長(zhǎng)因子-7抗體 0.2ml
FGF-8/HBGF-8 （Fibroblast growth factor 8） 成纖維細(xì)胞生長(zhǎng)因子-8/纖維母細(xì)胞生長(zhǎng)因子-8抗體 0.1ml
FGF-8/HBGF-8 （Fibroblast growth factor 8） 成纖維細(xì)胞生長(zhǎng)因子-8/纖維母細(xì)胞生長(zhǎng)因子-8抗體 0.2ml
FGF-10（Fibroblast Growth Factor-10） 成纖維細(xì)胞生長(zhǎng)因子-10/纖維母細(xì)胞生長(zhǎng)因子-10抗體 0.2ml
FGF-13（Fibroblast Growth Factor-13） 抗纖維母細(xì)胞生長(zhǎng)因子-13抗體 0.2ml
Phospho-CEBP alpha （Ser21） 磷酸化轉(zhuǎn)錄調(diào)節(jié)因子CEBP α 抗體 0.1ml
Phospho-CEBP alpha （Thr222/226） 磷酸化轉(zhuǎn)錄調(diào)節(jié)因子CEBP α 抗體 0.1ml
Phospho-CEBP beta （Ser105） 磷酸化轉(zhuǎn)錄調(diào)節(jié)因子CEBP β抗體 0.1ml
Phospho-CEBP beta （Thr235） 磷酸化轉(zhuǎn)錄調(diào)節(jié)因子CEBP β抗體 0.1ml
Phospho-CENP-A （Ser7） 磷酸化著絲粒蛋白A 0.1ml
FGF-BP（FGF-binding protein） 抗纖維細(xì)胞生長(zhǎng)因子結(jié)合蛋白抗體 0.2ml
bFGF-R/FGFR1（Fibroblast Growth Factor Receptor 1） 纖維母細(xì)胞生長(zhǎng)因子受體1抗體 0.1ml
bFGF-R/FGFR1（Fibroblast Growth Factor Receptor 1） 纖維母細(xì)胞生長(zhǎng)因子受體1抗體 0.2ml
KGFR/FGFR2（kilodalton growth factor receptors） 角質(zhì)形成細(xì)胞生長(zhǎng)因子受體/成纖維細(xì)胞生長(zhǎng)因子受體2抗體 0.1ml
KGFR/FGFR2（kilodalton growth factor receptors） 角質(zhì)形成細(xì)胞生長(zhǎng)因子受體/成纖維細(xì)胞生長(zhǎng)因子受體2抗體 0.2ml
FGFR3（Fibroblast Growth Factor Receptor 3） 成纖維細(xì)胞生長(zhǎng)因子受體3抗體 0.1ml
FGFR3（Fibroblast Growth Factor Receptor 3） 成纖維細(xì)胞生長(zhǎng)因子受體3抗體 0.2ml
Phospho-HER4 （Tyr1284） 磷酸化HER4抗體 0.1ml
FGFR4（Fibroblast Growth Factor Receptor 4） 成纖維細(xì)胞生長(zhǎng)因子受體4抗體 0.1ml
FGFR4（Fibroblast Growth Factor Receptor 4） 成纖維細(xì)胞生長(zhǎng)因子受體4抗體 0.2ml
fgl2 （Fibrinogen-like 2） 凝血酶原酶抗體/纖維介素蛋白/前凝血素抗體 0.2ml
Fibulin 1 抗“衰老關(guān)鍵蛋白”抗體 0.1ml
Fibulin 1 抗“衰老關(guān)鍵蛋白”抗體 0.2ml
Phospho-c-Fos （Thr232） 磷酸化c-fos抗體 0.1ml
Phospho-c-Fos （Thr325） 磷酸化c-fos抗體 0.1ml
Phospho-CHK2 （Thr68） 磷酸化細(xì)胞周期檢測(cè)點(diǎn)激酶2抗體 0.1ml
phospho-c-Jun/AP-1（Thr91+Thr93） 磷酸化原癌基因c-Jun抗體 0.1ml
Fibulin-5 抗“衰老關(guān)鍵蛋白”抗體 0.1ml
Fibulin-5 抗“衰老關(guān)鍵蛋白”抗體 0.2ml
Rabbit human Fibrinogen 兔抗人可溶性纖維蛋白原（親和層析純化 0.2ml
FLG（filaggrin 絲聚蛋白/中間絲蛋白抗體 0.2ml
FLIP S/L（Flice-like Inhibitory Protein） 凋亡調(diào)節(jié)基因之一抗體 0.1ml
FLIP S/L（Flice-like Inhibitory Protein） 凋亡調(diào)節(jié)基因之一抗體 0.2ml
phospho-4EBP1 （Ser65/Thr70） 磷酸化eIF4E結(jié)合蛋白抗體 0.1ml