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48T人白細(xì)胞介素-2ELISA 檢測(cè)試劑盒
發(fā)布時(shí)間： 2012-08-20 點(diǎn)擊次數(shù)： 1269次人白細(xì)胞介素-2ELISA 檢測(cè)試劑盒
用 途：
人IL-2 ELISA試劑盒用于體外定量檢測(cè)血清、血漿、組織、緩沖液中細(xì)胞上清液及各種體液中的IL-2 。本試劑盒可以檢測(cè)天然和重組的IL-2 。本試劑盒于科研、而非用于臨床診斷。
試驗(yàn)原理：
人IL-2 試劑盒是固相夾心法酶聯(lián)免疫吸附實(shí)驗(yàn)（ELISA）.已知IL-2 濃度的標(biāo)準(zhǔn)品、未知濃度的樣品加入微孔酶標(biāo)板內(nèi)進(jìn)行檢測(cè)。先將IL-2 和生物素標(biāo)記的抗體同時(shí)溫育。洗滌后，加入親和素標(biāo)記過(guò)的HRP。再經(jīng)過(guò)溫育和洗滌，去除未結(jié)合的酶結(jié)合物，然后加入底物A、B，和酶結(jié)合物同時(shí)作用。產(chǎn)生顏色。顏色的深淺和樣品中IL-2 的濃度呈比例關(guān)系。自備材料
蒸餾水。
加樣器：5ul、10 ul、50 ul、100 ul、200、500 u、1000lul。
振蕩器及磁力攪拌器等。安全性
此試劑盒的人血制品中的HbsAg、和抗HIV為陰性，但沒(méi)有實(shí)驗(yàn)室可*保證此血制品不會(huì)傳染肝炎、AIDS或其它傳染病，依據(jù)當(dāng)?shù)氐陌踩珬l例處理本試劑盒里的成份及血清和血漿等樣品。
避免直接接觸終止液和底物A、B。一旦接觸到這些液體，請(qǐng)盡快用水沖洗。
實(shí)驗(yàn)中不要吃喝、抽煙或使用化妝品。
不要用嘴吸取試劑盒里的任何成份。人白細(xì)胞介素-2ELISA 檢測(cè)試劑盒
操作注意事項(xiàng)
試劑應(yīng)按標(biāo)簽說(shuō)明書(shū)儲(chǔ)存，使用前恢復(fù)到室溫。稀稀過(guò)后的標(biāo)準(zhǔn)品應(yīng)丟棄，不可保存。
實(shí)驗(yàn)中不用的板條應(yīng)立即放回包裝袋中，密封保存，以免變質(zhì)。
不用的其它試劑應(yīng)包裝好或蓋好。不同批號(hào)的試劑不要混用。保質(zhì)前使用。
使用一次性的吸頭以免交叉污染，吸取終止液和底物A、B液時(shí)，避免使用帶金屬部分的加樣器。
使用干凈的塑料容器配置洗滌液。使用前充分混勻試劑盒里的各種成份及樣品。
洗滌酶標(biāo)板時(shí)應(yīng)充分拍干，不要將吸水紙直接放入酶標(biāo)反應(yīng)孔中吸水。
底物A應(yīng)揮發(fā)，避免長(zhǎng)時(shí)間打開(kāi)蓋子。底物B對(duì)光敏感，避免長(zhǎng)時(shí)間暴露于光下。避免用手接觸，有毒。實(shí)驗(yàn)完成后應(yīng)立即讀取OD值。
加入試劑的順序應(yīng)一致，以保證所有反應(yīng)板孔溫育的時(shí)間一樣。
按照說(shuō)明書(shū)中標(biāo)明的時(shí)間、加液的量及順序進(jìn)行溫育操作。樣品收集、處理及保存方法
血清-----操作過(guò)程中避免任何細(xì)胞刺激。使用不含熱原和內(nèi)毒素的試管。收集血液后，1000×g離心10分鐘將血清和紅細(xì)胞迅速小心地分離。
血漿-----EDTA、檸檬酸鹽、肝素血漿可用于檢測(cè)。1000×g離心30分鐘去除顆粒。
細(xì)胞上清液---1000×g離心10分鐘去除顆粒和聚合物。
保存------如果樣品不立即使用，應(yīng)將其分成小部分-70 ℃保存，避免反復(fù)冷凍。盡可能的不要使用溶血或高血脂血。如果血清中大量顆粒，檢測(cè)前先離心或過(guò)濾。不要在37℃或更高的溫度加熱解凍。應(yīng)在室溫下解凍并確保樣品均勻地充分解凍。洗滌緩沖液（20×）的稀釋：蒸餾水20倍稀釋。
人白細(xì)胞介素-2ELISA 檢測(cè)試劑盒
操作步驟
使用前，將所有試劑充分混勻。不要使液體產(chǎn)生大量的泡沫，以免加樣時(shí)加入大量的氣泡，產(chǎn)生加樣上的誤差。
根據(jù)待測(cè)樣品數(shù)量加上標(biāo)準(zhǔn)品的數(shù)量決定所需的板條數(shù)。每個(gè)標(biāo)準(zhǔn)品和空白孔建議做復(fù)孔。每個(gè)樣品根據(jù)自己的數(shù)量來(lái)定，能使用復(fù)孔的盡量做復(fù)孔。
加入稀釋好后的標(biāo)準(zhǔn)品50ul于反應(yīng)孔、加入待測(cè)樣品50ul于反應(yīng)孔內(nèi)。立即加入50ul的生物素標(biāo)記的抗體。蓋上膜板，輕輕振蕩混勻，37℃溫育1小時(shí)。
甩去孔內(nèi)液體，每孔加滿洗滌液，振蕩30秒，甩去洗滌液，用吸水紙拍干。重復(fù)此操作四次。如果用洗板機(jī)洗滌，洗滌次數(shù)增加一次。
每孔加入80ul的親和鏈酶素-HRP，輕輕振蕩混勻，37℃溫育30分鐘。
甩去孔內(nèi)液體，每孔加滿洗滌液，振蕩30秒，甩去洗滌液，用吸水紙拍干。重復(fù)此操作四次。如果用洗板機(jī)洗滌，洗滌次數(shù)增加一次。
每孔加入底物A、B各50ul，輕輕振蕩混勻，37℃溫育15分鐘。避免光照。
取出酶標(biāo)板，迅速加入50ul終止液，加入終止液后應(yīng)立即測(cè)定結(jié)果。
在450nm波長(zhǎng)處測(cè)定各孔的OD值。結(jié)果分析
以吸光度OD值為縱坐標(biāo)（Y），相應(yīng)的IL-2 標(biāo)準(zhǔn)品濃度為橫坐標(biāo)（X），做得相應(yīng)的曲線，樣品的IL-2 含量可根據(jù)其OD值由標(biāo)準(zhǔn)曲線換算出相應(yīng)的濃度。局限
6號(hào)標(biāo)準(zhǔn)品以上的結(jié)果為非線性的，根據(jù)此標(biāo)準(zhǔn)曲線無(wú)法得到的結(jié)果。人白細(xì)胞介素-2ELISA 檢測(cè)試劑盒
試劑盒性能
靈敏度：zui小的檢測(cè)濃度小于1號(hào)標(biāo)準(zhǔn)品。稀釋度的線性。樣品線性回歸與預(yù)期濃度相關(guān)系數(shù)R值為0.990。
特異性：不與人其它細(xì)胞因子反應(yīng)。
重復(fù)性：板內(nèi)、板間變異系數(shù)均小于10%。Catalase, suspension 過(guò)氧化氫酶 [9001-05-2] 2g
Catechol 鄰苯二酚 [120-80-9] 100g
Chitin 幾丁質(zhì) [1398-61-4] 500g
Chlorazol black E 卡拉唑黑E [1937-37-7] 25g
Chloroform:isoamyl alcohol （24:1） / 100ml
Catechol violet 鄰苯二酚紫 [115-41-3] 25g
Cedar wood oil 香柏油 [8000-27-9] 25ml
Cefotaxime, sodium salt 頭孢噻肟鈉 [64485-93-4] 100g
Celestine blue B 天青石藍(lán) [1562-90-9] 25g
Cell Isolation Optimizing System 細(xì)胞分離試劑盒 / 1kit
D-（+） Cellobiose D-纖維二糖 [528-50-7] 25g
Cellulase 纖維素酶 [9012-54-8] 1g
Cellulose, Microcrystalline 微晶纖維素 [9004-34-6] 100g
Cellulose acetate 乙酸纖維素 [9004-35-7] 100g
Cephalosporin C, sodium salt [51762-04-0] 25g
Cephalosporin C, sodium salt [51762-04-0] 100g
Chicago sky blue 6B 滂胺天藍(lán) [2610-05-1] 25g
Cephalexin monohydrate 頭孢氨芐 [15686-71-2] 250mg
Cephalexin monohydrate 頭孢氨芐 [15686-71-2] 5g
Cephalexin monohydrate 頭孢氨芐 [15686-71-2] 25g
Cerium（III） acetate hydrate 乙酸鈰 [206996-60-3] 50g
Cerium（III） carbonate, hydrate 碳酸鈰 [54451-25-1] 50g
Cerium （III） chloride, heptahydrate 化鈰七水 [18618-55-8] 50g